Иммунодиагностика вироза

Иммунодиагностика вироза – использование иммунологических методов для диагностики вирусных заболеваний растений[3].


Перспективность иммунодиагностических методов в целях диагностики заболеваний, а также внутривидовой и межвидовой дифференциации фитопатогенов оценена фитопатологами достаточно давно. Отмечается, что первоначально эти методы использовались только для идентификации фитовирусов[3].

История развития

Первые антисыворотки к грибам были получены в 1903 году. В 1937 году делались попытки диагностировать с помощью иммунологических реакций виды грибов Рода Tilletia, паразитирующих на растениях семейства злаковых[3].

Систематическое использование иммунодиагностики приходится на 60-е годы прошлого столетия. В 1961 году результаты развития первого этапа иммунодиагностических методов были обобщены Кровэлом. Отмечается, что в это время иммунодиагностические методы служили в основном для подтверждения таксономического статуса патогена, установленного с помощью традиционных методов фитопатологии и микробиологии. Одновременно они позволяли выявить внутривидовые отличия фитопатогенов, установив различные серотипы у патогенов, принадлежащих к одному типу[3].

В 70–80 годах прошлого века в практику исследования фитопатогенов, в том числе вирусов, ввели метод иммуноферментного анализа, что значительно расширило возможности иммунодиагностики заболеваний растений[3].

Принципы иммунодиагностики

Все методы иммунодиагностики основываются на способности антител связывать антигены. Следовательно, перед любым иммунологическим тестом стоит задача – обнаружения и (или) определения количественной характеристики взаимодействия диагностических (специфичных) антител с детектируемыми (гомологичными) антигенами[3].

Эта задача решается различными способами. Комплексы «антигенантитело» обнаруживаются визуально, поскольку способны формировать видимые невооруженным глазом либо различимые под микроскопом преципитаты в жидкой среде или геле[3].

Антитела, участвующие во взаимодействии, могут соединяться химически с флуоресцентным красителем. Комплекс «антигенантитело» обнаруживается под флуоресцентным микроскопом[3].

Антитела с радиоактивной меткой используют для количественного определения антигена. Антитела, маркированные коллоидным золотом, используют для иммуногистохимических исследований[3].

Методы иммунодиагностики

Наиболее распространены на практике методы:

  1. Серологические методы иммунодиагностики вирозов – основаны на иммуногенных и антигенных свойствах фитовирусов. Они позволяют установить вид вируса, генетические взаимоотношения между вирусами, определить концентрацию и локализацию вируса в клетках и тканях растений. Методы широко применимы в медицине, ветеринарии и фитопатологии в целях диагностики вирусных, микоплазменных и бактериальных заболеваний[1]. Для изучения вирусов серологический метод впервые применил М. Дворак в 1927 году. Дальнейшее развитие он получил в работах Л.С. Дунина и Н.Н. Поповой (1937), предложившими капельный метод серодиагностики[2].
  2. Иммуноферментный анализ вироза (ИФА) или ELISA-тест (Ensyme-linked immunosorbent assay) – это высокочувствительный метод иммунодиагностики. В его основе лежит использование связанных с энзимами антител для определения специфических антигенов. Применяется для диагностики вирусов со всеми возможными формами вирионов. Широко применяется в ветеринарии, медицине, фитопатологии. Используется для выявления бактерий, грибов и вирусов во всех органах растений, в том числе в семенах и плодах[1].
  3. Иммунофлуоресцентный анализ – люминесценция в ультрафиолетовом свете под микроскопом биологического объекта, содержащего изучаемый антиген. Изучаемый образец предварительно обрабатывается специфическими антителами, меченными флюорохромом[3].
  4. Иммуноблоттинг (Вестерн блоттинг) – высокочувствительный способ исследования белков. Применяется для диагностики фитопатогенных микроорганизмов и вирусов по их белковым антигенам[3].
  5. Иммунологический анализ в тканях растений – метод иммунных отпечатков (Tissue Blot Immunoassay – TBI), позволяющий с большой точностью локализовать антигены фитопатогенных организмов (главным образом вирусов) в растительных тканях[3].
 

Оставьте свой отзыв:

Отзывы:

Комментарии для сайта Cackle

Составитель:

 

Страница внесена:

Последнее обновление: 13.04.21 09:13

Статья составлена с использованием следующих материалов:

Литературные источники:
1.

Власов Ю.И., Ларина Э.И., Трускинов Э.В. Сельскохозяйственная фитовирусология СПб.- Пушкин: ВИЗР, 2016. — 236 с. Приложение к журналу "Вестник защиты растений", Выпуск 17.

2.

Карташева И.А. Сельскохозяйственная фитовирусология, Учебное пособие. — М.: Колос; Ставрополь: АГРУС, 2007. — 168 с.

Источники из сети интернет:
3.

Дьяков Ю.Т., редактор, Фундаментальная фитопатология. – М.: КРАСАНДР, 2012 – 512 с.

Свернуть Список всех источников