Серологические методы иммунодиагностики вирозов

Серологические методы иммунодиагностики вирозов – имммунодиагностические методы диагностики вирусных болезней растений и идентификации вирусов, основанные на иммуногенных и антигенных свойствах фитовирусов, позволяющие устанавливать вид вируса, генетические взаимодействия между вирусами, определять концентрацию и локализацию вируса в клетках и тканях инфицированного растения[1].


В основе всех серологических реакций лежит специфическое взаимодействие антитела и антигена[2].

Типы серологических реакций

Серологическими называют реакции иммунодиагностики вирозов и заболеваний других патогенных этиологий, для постановки которых используются сыворотки (serum), содержащие антитела (антисыворотки). В серологической реакции один ингредиент (компонент) всегда известен. Применяются такие реакции в двух случаях:

При диагностике фитопатогенных вирусов используют два типа серологических реакций:

  1. Преципитации – образование специфического осадка при взаимодействии антител с антигеном, который представляет собой молекулы белка или полисахаридов. Если вирионы, определяемого вируса имеют палочковидную форму, то осадок рыхлый хлопьевидный, при изометрических вирионах – плотный зернистый[2][1].
  2. Агглютинации (склеивания) – проводятся с неочищенным соком растений, в котором вирионы адсорбированы на хлоропластах, обрывках клеточных стенок, митохондриях и других клеточных компонентах. Они вовлекаются в серологическую реакцию, образуя хорошо заметный осадок в виде сгустков – агглютинат[2][1].

Методы серодиагностики

Разработано множество методов серодиагностики, основанных на вышеуказанных типах реакций, приведем примеры только некоторых:

  1. Капельный метод – на стекло наносят каплю диагностической сыворотки и каплю нормальной сыворотки (без антигена). К каждой добавляют по капле сок исследуемых растений. Капли выдерживают во влажной камере при +22ºC в течение 4 минут. Нормальная сыворотка – контроль. Реакция положительная, если в капле с антисывороткой виден четкий осадок, отсутствующий в капле с нормальной сывороткой[1].
  2. Латекс-метод – основан на добавлении к антисыворотки полимерного соединения латекса. Оно адсорбируется на поверхности антител и способствует агглютинации при взаимодействии антигенантитело и усиливает видимую реакцию. Чувствительность метода по сравнению с капельным возрастает в 100 и более раз. Техника такая же, как при капельном методе[2].
  3. Реакция преципитации в агаре по Ухтерлони – основана на различной скорости диффузии в агаре молекул антигена и антител. Агар высшей очистки тонким слоем наносят на стеклянные пластинки слоем около 3 мм. После застывания в слое агара вырезают лунки диаметром 5 мм: центральную и на расстоянии 1–1,5 см от нее 4–6 лунок. В центральной размещают антисыворотку, в остальных – вирусный препарат или сок исследуемого растения. Растворы антигена и антител диффундируют навстречу друг другу. При положительной реакции между центральной и периферическими лунками появляется дуга или прямая линии преципитации. Она хорошо видна в прозрачном агаре на темном фоне при боковом освещении[2].
  4. Нейтрализация инфекционности – вирус смешивают со специфической сывороткой, которая резко снижает его инфекционность без нарушения структуры. Метод используется при разделении вирусов в смешанных инфекциях. Кроме того, данный прием позволяет изучать серологическое родство между вирусами, передаваемыми только тлями[1].
 

Оставьте свой отзыв:

Отзывы:

Комментарии для сайта Cackle

Составитель:

 

Страница внесена:

Последнее обновление: 13.04.21 15:40

Статья составлена с использованием следующих материалов:

Литературные источники:
1.

Власов Ю.И., Ларина Э.И., Трускинов Э.В. Сельскохозяйственная фитовирусология СПб.- Пушкин: ВИЗР, 2016. — 236 с. Приложение к журналу "Вестник защиты растений", Выпуск 17.

2.

Карташева И.А. Сельскохозяйственная фитовирусология, Учебное пособие. — М.: Колос; Ставрополь: АГРУС, 2007. — 168 с.

3.

Комкова О.П. Механизмы серологических реакций: Методические указания для студентов медицинского факультета / О.П. Комкова, А. М. Образцова, Н. А. Сидорова; ПетрГУ. - Петрозаводск, 2006. - с.61

Свернуть Список всех источников